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亲子鉴定位点检测结果是如何得出来的?(DNA提取物、基因扩增仪)

时间:2022-03-22 15:08 阅读:282 来源:互联网
回顾:2004年底,王纳文一纸诉状将足球明星高峰告上了法庭,称自己的孩子是同高峰所生,双方僵持不下,各执一词,让人无法辨别。最后高峰提出通过亲子鉴定的方法,鉴定孩子是不是自己的。这是国内首例名人DNA亲子鉴定案。

2004年11月18日,北京朝阳区中级人民法院在交换证据时正式公布了“高峰亲子案”的鉴定结果,根据DNA检验显示:王圣元与高峰有99.9999994%的可能性为亲子关系。


99.9999994%,为什么DNA亲子鉴定测试的准确性会有这么高?


科学家在过去的研究中发现,人与人之间的99.99%的遗传密码序列都相同,但又存在万分之一的差别,使每个人都具备区别于他人的碱基序列,这就是DNA的多态性。(每个人多态性位点的差别就成为个人识别的标志)根据遗传学的传递规律,子女的身份标记必定来自双亲,据此可用于亲子鉴定。


亲子鉴定位点检测结果是如何得出来的?(DNA提取物、基因扩增仪)

△基因序列中的atcg四个碱基


那么,99.99%以上的准确率是如何得出来的?


目前,鉴定亲子关系用得最多的是DNA分型鉴定。


第一步需要做待检准备,待检物绝对不能混入其他杂质。


第二步就是DNA提取。


目前,最为常见的是通过血斑进行DNA鉴定,也就是说,要采集血样做鉴定。


DNA提取常用方法一般采用“直扩法”,也就是采用人类荧光标记STR复合扩增试剂盒(试剂盒里包含了DNA提取、扩增所需的试剂)进行PCR复合扩增。血斑用打孔器打出所需的样本大小,放入PCR反应管中,加入反应物缓冲液和引物混合体系,振荡摇匀。


这是最为费钱的一步,因为试剂盒是进口的,每次加入的试剂费用就要数百元。在进入加样区之前,实验人员先打开紫外线消毒灯,对整个房间进行消毒,确保加样房间没有任何的病菌及粉尘等,实验者也尽量不要说话。


亲子鉴定位点检测结果是如何得出来的?(DNA提取物、基因扩增仪)

△DNA实验室

 

试剂里边包括酶、引物等试剂,每个试管要加入0.2微升。加入试剂后,要将小试管放入小的混合器,让试剂和DNA样本充分混合。


第四步:扩增,DNA提取物不断繁殖分裂。为了能达到检测需求的量,要把小试管放入一个叫做扩增仪的仪器。把试管放入扩增仪后,里边的DNA提取物将不断繁殖、分裂。在一般情况下,经过2-3个小时的扩增,DNA提取物的量就能达到检测量。也就是说,要真正进行DNA检测、比对了。


第五步:检测,提取21个基因位点数据进行比对。检测是在一个叫做遗传分析仪进行毛细管电泳和基因分型。这种设备非常先进,把扩增完的小试管放入仪器后,设备会自动从试管中提取DNA提取物,然后自动选择DNA位点,分析染色体。在一般情况下,设备会自动提取21个位点,然后,系统自动将需要做亲子鉴定的两个样本进行自动比对。


根据遗传学原理,如果所有的位点遗传信息都能匹配成功,我们也就能大概说,这对父子或者母子是亲子关系。当然,这只是最简单、最直观的看法,要判断孩子是否亲生,还要经过更加严谨的计算。


计算时,有个亲权指数(PI)计算,因为该公式类似于(p除以p+1)的模式,这个模式决定其结果不可能是整数。而且,因为世上没有绝对相同的DNA,因此最高只能算出99.99%以上的准确率。


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